基因组编辑动物被广泛应用于各个研究领域。基因组编辑领域的最新进展,特别是CRISPR/Cas9系统(Clustered Regulatory Interspaced Short Palindromic Repeats /CRISPR associated protein),使基因组编辑动物的快速生成变得容易。然而,制造这种动物的过程涉及多个复杂的步骤,也需要特殊的技术,如处理受精卵体外.许多研究人员希望有一种简单方便的方法来生成基因组编辑的动物。
实验鼠(鼠形)是人类疾病的常见模式。虽然与使用老鼠相比有几个优势,但处理老鼠基因组的技术还比较落后。现在有了一种新的、更简单的大鼠基因组编辑方法,即rGONAD(通过输卵管核酸递送的大鼠基因组编辑)。
虽然性腺功能亢进方法目前已经成功地在小鼠和大鼠身上实施,但这个概念也可以适用于其他动物。
rGONAD方法包括两个关键步骤:用含有Cas9蛋白的溶液注射,引导RNA和单链DNA (ssDNA)进入输卵管,然后电穿孔。经历了rGONAD的老鼠会像往常一样繁殖直到出生,在出生后的后代会被进行基因组编辑并用于进一步的分析。此外,rGONAD在敲除和敲入系统中都是高效的。
目前动物基因组工程的标准方法包括三个主要步骤:分离雌性受精卵,显微操作体外然后转移到假怀孕的雌性体内。这些步骤很复杂,需要熟练的训练才能完成;rGONAD克服了这些警告。
此外,在3Rs (reduce, Replacement, and Refinement)的伦理背景下,标准方法消耗了很多雌性老鼠,而雌性老鼠可以在rGONAD系统中循环使用。虽然性腺功能亢进方法目前已经成功地在小鼠和大鼠身上实施,但这个概念也可以适用于其他动物。因此,性腺发育研究是动物基因组编辑的有力手段。
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